茶多酚的提取方法 目前，茶多酚的提取方法主要有溶劑提取法、離子沉淀法、微波浸提法、超聲波浸提法、超臨界流體萃取法、樹脂吸附分離法6種[2-3] 。 2.1 溶劑提取法 溶劑提取法利用茶葉中多酚物質(zhì)和咖啡堿等有機(jī)物質(zhì)在不同的溶劑中溶解度的差異進(jìn)行分離，利用能與溶劑不互溶的茶多酚萃取劑將茶多酚萃取提純。其工藝路線為： 茶葉粉碎--浸提--有機(jī)溶劑脫色、脫咖啡堿--乙酸乙酯萃取--回收溶劑干燥--茶多酚[4] 常用的浸提劑為水或者62616964757a686964616fe78988e69d8331333335343438水與其他有機(jī)溶劑互用，并得出水與有機(jī)溶劑互用比純水用作浸提劑效果要好。溶劑萃取法優(yōu)點(diǎn)是：(1)容易實(shí)現(xiàn)工業(yè)化，整個(gè)操作工藝流程可以為間歇或者連續(xù)生產(chǎn)且穩(wěn)定可靠；(2)有機(jī)溶劑可以回收利用。缺點(diǎn)主要有：(1)得率較低，往往采用其他手段來(lái)提高其得率；(2)較高溫度的浸提條件使得產(chǎn)品在提取過(guò)程中易氧化，產(chǎn)品純度也比較低；(3)茶多酚中咖啡堿的含量是一項(xiàng)很重要的指標(biāo)，氯仿在工藝中用作咖啡堿的脫除，氯仿等有毒的有機(jī)溶劑的使用影響到茶多酚的質(zhì)量和應(yīng)用范圍(如不能用于食品工業(yè))，同時(shí)大量有毒、易燃的有機(jī)溶劑對(duì)生產(chǎn)安全產(chǎn)生一定隱患；(4)萃取工藝一般采用多級(jí)萃取操作，溶劑回收需要進(jìn)行多級(jí)蒸餾，工藝操作復(fù)雜，能耗大。 2．2離子沉淀法 離子沉淀法是利用茶多酚在中性或堿性條件下可以跟跟金屬離子Al3+ 、Bi3+ 、Ca2+ 、Ag+ 、Hg2+ 等產(chǎn)生絡(luò) 合沉淀的特點(diǎn)，使其從浸提液中分離出來(lái)，從而與水溶液中的咖啡堿、單糖、氨基酸等組分分離，得到純度較高的茶多酚[5] 。其一般工藝路線為： 茶葉原料—乙醇提取—減壓過(guò)濾—金屬離子沉淀--酸溶—乙酸乙酯萃取--濃縮—真空干燥—精制茶多酚 [6] 采用茶多酚與沉淀劑絡(luò)合沉淀從而純化茶多酚的優(yōu)點(diǎn)在于：(1)產(chǎn)品純度高；(2)減少了大量有機(jī)萃取劑的使用，減少一定量的能耗；(3)工藝流程上來(lái)看，包含了有機(jī)溶劑以及沉淀劑的回收利用，工藝簡(jiǎn)單易實(shí)現(xiàn)，沉淀劑等輔料成本較低。缺點(diǎn)在于：(1)金屬離子的使用限制了茶多酚的應(yīng)用范圍，某些殘留在茶多酚中有毒金屬離子含量較高，其產(chǎn)品不能為醫(yī)藥行業(yè)所接受；(2)在生產(chǎn)過(guò)程中大量廢渣的產(chǎn)生無(wú)疑對(duì)環(huán)境造成巨大壓力；(3)轉(zhuǎn)溶過(guò)程中程序較為繁瑣，導(dǎo)致部分多酚被氧化，降低得率； (4)生產(chǎn)設(shè)備條件要求苛刻，對(duì)生產(chǎn)裝臵，輔助設(shè)備以及管路的耐腐蝕性有較高的要求。 2.3微波浸提法 該法的基本原理是利用分子在微波場(chǎng)中發(fā)生高頻的運(yùn)動(dòng)，擴(kuò)散速率增大，從而將茶多酚等浸提物在微波的作用下快速浸取出來(lái)。使用微波萃取的優(yōu)化條件為80o C，固液比為1：15，時(shí)間1．5min[7] 。王瑩采用微波輔助萃取技術(shù)提取日照綠茶中的茶多酚，提取率高達(dá)14．21％[8] 。Ezzohra Nkhili等比較了微波輔助水提取(MWE)和傳統(tǒng)的加熱輔助水提取(CWE)兩種方法對(duì)茶多酚提取的影響，結(jié)果表明，用MWE方法提取的茶多酚含量高于CWE 方法，特別是EGCG的含量達(dá)到77．14 mg／g，高于用CWE方法的64．18 mg [9] 。 利用微波輔助浸提，可縮短浸提時(shí)間，避免了茶多酚的氧化，有效地保護(hù)原料中的活性成分；提取率高，節(jié)約了溶劑，大大提高了提取效率；避免使用有毒溶劑、產(chǎn)品安全。微波輔助萃取技術(shù)節(jié)省能源，省工、省時(shí)、對(duì)環(huán)境友好、宜于批量浸提、便于推廣等優(yōu)點(diǎn)，是一種可持續(xù)發(fā)展的技術(shù)。 2.4超聲波浸提法 超聲波輔助提取茶多酚，最佳條件為70o C,lOOW超聲輻射下用80％乙醇按料液比1：10提取20min [10—11] 。提取的茶多酚含量較高，防止茶多酚被氧化，保持高品質(zhì)。工藝過(guò)程為： 茶葉+乙醇—超聲提取—過(guò)濾—蒸發(fā)濃縮—氯仿萃取—乙酸乙酯萃取—蒸發(fā)回收酯—烘干的粗茶多酚 --純化[12] 超聲波提取茶多酚的工藝簡(jiǎn)單，尤其是結(jié)合溶劑法、沉淀法和樹脂吸附法用于提取制備，取得了較好的成效。該方法具有提取溫度低、減少浸提所需時(shí)間，提高浸提效果，避免茶多酚在長(zhǎng)時(shí)間高溫下氧化的可能，回收率高、氧化損耗小，節(jié)時(shí)、節(jié)能、提取率高等優(yōu)點(diǎn)，同時(shí)避免了有毒溶劑的使用，提取工藝成本低，綜合經(jīng)濟(jì)效益顯著，具有良好的工業(yè)推廣價(jià)值 。 2．5超臨界流體萃取法 超臨界流體萃取法是一種新型分離方法，利用溫度和壓力略超過(guò)或靠近臨界的介于氣體和液體之間的流體作為萃取劑，從固體或液體中萃取某種高沸點(diǎn)和熱敏性成分，達(dá)到分離和提純的目的 [13] 。工藝過(guò)程為： 茶葉--茶汁--濃縮--超臨界CO2萃取--有機(jī)溶劑萃取--酯相濃縮干燥--超臨界C02萃取--茶多酚[4] 。 超臨界CO2流體萃取法提取茶多酚與其他的提取分離技術(shù)相比較，其主要的優(yōu)點(diǎn)是：(1)采用CO2：作為萃取劑，大大降低了工藝對(duì)環(huán)境的污染，產(chǎn)品中幾乎沒有毒金屬或者有機(jī)溶劑的殘留，目前超臨界流體是唯一能取代毒性較大的有機(jī)溶劑對(duì)咖啡堿等進(jìn)行萃取的物質(zhì)；(2)萃取條件溫和，有效地防止茶多酚的氧化。其主要的缺點(diǎn)是： (1)兒茶素等在非極性的超臨界CO2 流體中溶解度很低，往往需要用到醇類溶液作為夾帶劑，提取率和純度不高；(2)萃取設(shè)備條件比較嚴(yán)格，往往需要特定設(shè)計(jì)，工藝投資額大，生產(chǎn)成本比較高，目前工業(yè)化只能小規(guī)模生產(chǎn)，萃取物要經(jīng)過(guò)多次精制才能提純。 2．6樹脂吸附分離法 樹脂吸附法分離原理是根據(jù)吸附樹脂對(duì)多酚類有選擇性吸附、解吸作用的特性來(lái)實(shí)現(xiàn)茶多酚與其它浸提物組分之間的分離。樹脂吸附法對(duì)樹脂的種類以及結(jié)構(gòu)有較高要求，多孔樹脂的比表面積、孔隙率以及樹脂的極性都影響了對(duì)茶多酚的吸附容量。極性多酚易與極性樹脂以氫鍵等方式進(jìn)行締合，再將吸附了茶多酚的樹脂用合適的有機(jī)溶劑進(jìn)行洗脫，然后用乙酸乙酯等將洗脫液進(jìn)行萃取，從而有選擇性地將茶多酚從其浸提液中分離。其工藝流程為： 茶葉--熱水提取--濃縮--吸附柱吸附--解脫劑洗脫--茶多酚洗脫液減壓蒸餾回收溶劑--真空干燥--粉狀粗茶多酚--水溶解成溶液--乙酸乙酯提取--減壓蒸餾回收溶劑--真空干燥--粉晶態(tài)茶多酚[4] 。 樹脂吸附法分離茶多酚的優(yōu)點(diǎn)為：(1)選擇茶多酚產(chǎn)物中一種或幾種的兒茶素目標(biāo)性強(qiáng)，可以有選擇地進(jìn)行吸附分離目標(biāo)兒茶素； (2)純度高，同時(shí)對(duì)咖啡堿的脫除率高；(3)產(chǎn)品的應(yīng)用范圍廣；(4)樹脂吸附一解吸過(guò)程一般都在比較溫和的溫度下進(jìn)行，避免了茶多酚的損失；(5)過(guò)程中避免了有毒有機(jī)溶劑的使用并且容易回收，此方法是目前茶多酚清潔化生產(chǎn)的主要研究趨勢(shì)。主要的缺點(diǎn)為：(1)樹脂再生的重復(fù)使用率限制了樹脂吸附法生產(chǎn)茶多酚的規(guī)模，因此往往只能適合小規(guī)模的生產(chǎn)；(2)樹脂的價(jià)格昂貴給生產(chǎn)成本造成了壓力；(3)整個(gè)過(guò)程中使用了大量的有機(jī)溶劑，脫附過(guò)程往往較繁瑣。 6結(jié)論與展望 茶多酚作為一種天然的抗氧化劑，在食品、化妝品、保健品等應(yīng)用領(lǐng)域的需求逐步的擴(kuò)大。目前部分已經(jīng)工業(yè)化的提取純化工藝相對(duì)比較落后，都存在著一定的弊端，有毒有機(jī)溶劑以及某些重金屬離子都會(huì)限制茶多酚制品在食品或者醫(yī)藥方面的應(yīng)用；大孔徑樹脂吸附法以及超臨界CO2流體萃取法是比較熱門的方法，但是巨額成本及操作費(fèi)用限制了茶多酚生產(chǎn)的規(guī)?；?。理想的茶多酚提取純化工藝技術(shù)應(yīng)該滿足工藝過(guò)程簡(jiǎn)單，操作方便，且安全性好，提取率高，產(chǎn)品純度好，無(wú)毒性或毒性小，適應(yīng)工業(yè)生產(chǎn)需要等要求，所以新型茶多酚提取純化工藝有待于進(jìn)一步開發(fā)研究。 （1）新型萃取劑的開發(fā)應(yīng)用到茶多酚的提取中。雙水相萃取技術(shù)是新出現(xiàn)的一種極有前景的新型分離技術(shù)，與離子液體、超臨界流體并稱為21世紀(jì)3大綠色溶劑。與傳統(tǒng)的有機(jī)溶劑萃取劑相比，雙水相萃取技術(shù)分相時(shí)間短，有助于活性物質(zhì)在兩相中的質(zhì)量傳遞，幾乎沒有溶劑殘留問(wèn)題，產(chǎn)品對(duì)人體無(wú)害，工藝易于放大和連續(xù)操作，能夠?yàn)樯锘钚晕镔|(zhì)提供一種溫和的環(huán)境，不易使茶多酚氧化失活。雙水相的種類以及組成，茶多酚、咖啡堿等在雙水相中的分配關(guān)系是雙水相萃取茶多酚今后研究的重點(diǎn)。 (2)超大孔連續(xù)床用于茶多酚的純化。超大孔連續(xù)床內(nèi)有許多尺寸達(dá)數(shù)微米至數(shù)百微米的超大孔隙，并可在孔隙內(nèi)進(jìn)行化學(xué)修飾，使其可以與茶多酚形成氫鍵，使原料液中細(xì)胞碎片等固相順利通過(guò)，并可實(shí)現(xiàn)與目標(biāo)物進(jìn)行締合，從而有效分離出目標(biāo)茶多酚，且成本較低，可以將離心、過(guò)濾、濃縮和層析分離多個(gè)步驟集于一體，目標(biāo)物在床內(nèi)的停留時(shí)間短，選擇性強(qiáng)。超大孔連續(xù)床的制備以及孔隙內(nèi)的化學(xué)修飾一直是新型生物分離的關(guān)鍵，床體的強(qiáng)度、尺寸以及再生等都有待于進(jìn)一步研究。